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腦科學/腦疾病/神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型

大小鼠腦出血造模

日期：2020-12-06 21:16:55 點擊：0

一、材料

動物：大鼠或者小鼠
試劑：膠原酶（廠家：ThermoFisher）、生理鹽水
儀器設備和耗材，如下：

序號	貨號	型號	名稱	規(guī)格	單位	數(shù)量
1	10-0030	Nova1000	小動物麻醉機	移動型、異氟烷罐、POUR FILL、CAGE MOUNT。一體化集成功能配置：移動支架、內(nèi)置氣源泵、抽氣泵、廢氣吸收罐、大小鼠預麻箱、抽屜箱、置物籃及管路	臺	1
2	10-2203		小鼠定位儀專用面罩-G2		個	1
3	10-2204		大鼠定位儀專用面罩-G2		個	1
4	30-1040	SR200D	腦立體定位儀	大鼠、雙臂、數(shù)顯	套	1
5	20-0100	Elite100	腦立體專用微量注射泵	0.5ul-100ul,注射回抽，觸屏	套	1
6	19-7010	FASTRONG	顱鉆	0-35000RPM順逆轉(zhuǎn)，腳踏和手控，帶鉆頭	套	1
7	16-0050	FOI304	LED冷光源	色溫6000K，35W光強可調(diào)	套	1
8	16-0003	SM200B	體視顯微鏡	搖臂式雙目	套	1
9	21-2000		HAMILTON注射器	5ul/700N/pst2尖頭/26sG/51MM	支	1
10	18-8010		大腦手術(shù)器械包	13件套	套	1
11	18-8090		動物手術(shù)消毒套裝	7件套	套	1
12	19-7001		小動物剃毛器		套	1
13	19-7223		紅霉素眼膏	0.5%*2G（5支/包）	包	1
14	10-3022		氣體吸收罐	#S，6個/箱	箱	1
15	10-3026		活性炭	6袋/箱	箱	1
16	24-0058		平衡木	1.25M	套	1
17	26-0080	HG620	爪抓力測試儀		套	1
18	26-0010	HR420M	轉(zhuǎn)棒儀(6只小鼠)		套	1
19	26-0020	HR420R	轉(zhuǎn)棒儀(4只大鼠)		套	1

二、方法（以大鼠為實驗對象）

準備成年wistar大鼠，體重250－300g，禁食12h，禁水6h；
使用氣體麻醉機，將動物放入預麻箱，異氟烷快速深度麻醉；
取出動物，將動物頭部固定于立體定位儀上（安裝有定位儀專用麻醉面罩），接通氣體麻醉機，使動物維持麻醉，即可開始手術(shù)；
老鼠眼部涂紅霉素眼膏，以防干裂；
老鼠頭部備皮，酒精和碘伏棉球消毒后，頭皮正中切口，剝離骨膜，確定前囟參考零點坐標，然后移動定位儀X和Y軸操作臂（右臂），定位到前囟后1mm，中線偏左3mm處，顱鉆鉆直徑0.6mm的小孔；
進一步用固定在立體定位儀左臂的微量注射泵（裝有注射器和藥物）沿小孔中心位置，垂直緩慢進針，進針深度6mm（左側(cè)尾狀核的位置），設置注射參數(shù)，緩慢注入膠原酶VII0.5U（用生理鹽水配成1U/uL），注藥后留針10分鐘；
注射完畢，縫合皮膚，回籠飼養(yǎng)，給予正常進食進水，室溫控制在25度左右。
術(shù)后觀察神經(jīng)癥狀體征。

三、模型評判

BBB觀察評分：據(jù)Berderson等的評分標準分為三級。I級：將大鼠尾巴提起來，癱瘓側(cè)前肢回收后屈曲于腹下，正常側(cè)前肢向地面伸展；II級：除以上體征外，向癱瘓側(cè)推大鼠時阻力較對側(cè)明顯降低；III級：除以上癥狀外，大鼠有向患側(cè)側(cè)旋的行為。出現(xiàn)以上癥狀為造模成功；
儀器測評：平衡木、爪抓力和轉(zhuǎn)棒，與動物協(xié)調(diào)性、力量性指標相關(guān)儀器進行測量。

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